晋职称论文封面模板《期刊发表》晋职称论文封面模板

发布于 2021-09-04 09:07

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观察血红素加氧酶-1(HO-1)过表达对脊髓损伤(SCI)后运动功能恢复的影响,并探讨其机制。方法96只健康雄性SD大鼠,应用完全随机法分为假手术组(Sham组)、单纯SCI组(SCI组)、空载体组[AAV-增强型绿色荧光蛋白(EGFP)组]和HO-1过表达腺相关病毒载体组(AAV-HO-1组),采用重物压迫脊髓损伤模型;采用Basso-Beattie-Bresnahan (BBB)评分评估大鼠后肢运动功能;原位缺口末端标记法(TUNEL)检测脊髓组织细胞凋亡;荧光显微镜下观察EGFP表达;免疫荧光染色显示脊髓组织中神经元核性蛋白(NeuN)阳性细胞的表达;Western blot测定脊髓组织中HO-1、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)蛋白表达。结果SCI后1 d,可观察到AAV-EGFP组和AAV-HO-1组脊髓组织有EGFP表达;AAV-HO-1组与SCI组和AAV-EGFP组比较,凋亡细胞数量[分别为(21.50±8.02)%、(49.83±13.60)%、(44.83±11.74)%]、bax蛋白表达量(分别为1.15±0.19、1.96±0.24、1.77±0.30)明显减少,差异有统计学意义(分别为F=30.630,P=0.000;F=29.900,P=0.000),而AAV-HO-1组与SCI组和AAV-EGFP组比较,HO-1(分别为1.96±0.28、1.48±0.23、1.54±0.16)、bcl-2蛋白表达量(分别为0.69±0.13、0.35±0.11、0.29±0.10)明显增加,差异有统计学意义(分别为F=23.900,P=0.000;F=68.140,P=0.000);SCI后7、14、21 d,AAV-HO-1组BBB评分[分别为(8.00±1.79)、(11.67±2.16)、(13.83±2.22)分]明显高于SCI组[分别为(5.17±1.94)、(6.17±1.72)、(7.50±1.97)分]和AAV-EGFP组[分别为(4.67±1.51)、(5.67±1.86)、(7.17±2.14)分],差异有统计学意义(分别为F=152.900,P=0.000;F=109.700,P=0.000;F=75.880,P=0.000)。SCI后21 d,AAV-HO-1组(108.5±27.74)的NeuN阳性细胞较SCI组(50.00±20.93)和AAV-EGFP组(55.83±13.57)明显增加,差异有统计学意义(F=40.740,P=0.000)。结论HO-1过表达能明显提高SCI后运动功能的恢复,对SCI具有保护作用。

目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-410对人髓核细胞增殖及分泌表达的影响。方法实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测人髓核细胞转染miR-410 mimics后miR-410表达水平;转染后细胞培养12、24、48、72 h,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖;双荧光素酶报告基因检测miR-410与低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的靶标关系;Western blot检测聚集蛋白聚糖(Aggrecan)、Ⅱ型胶原蛋白α1链(Col2A1)和HIF-1α的表达水平。结果与scramble组比较,转染miR-410 mimics后miR-410的表达显著增加(0.85±0.12比2.74±0.34,P=0.015)。CCK-8结果显示与scramble组比较,转染miR-410 mimics后细胞存活率逐渐增加,并存在时间依赖性,72 h时最显著(1.15±0.12比0.62±0.05,P=0.003);miR-410过表达使Aggrecan和Col2A1蛋白表达量显著上升(0.96±0.08比3.23±0.29,P=0.003;0.96±0.06比2.45±0.18,P=0.000)。双荧光素酶报告基因检测结果表明miR-410与HIF-1α存在直接的靶标关系(0.32±0.15,P=0.000);miR-410过表达抑制HIF-1α蛋白表达水平(0.53±0.04,P=0.007)。结论miR-410过表达促进人髓核细胞增殖并增加Aggrecan和Col2A1表达,其机制可能与靶向抑制HIF-1α表达有关。

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